走进教学实验室,发现朱岚汀所在的那一个小组,包括助教在内,都围在一个电泳槽旁愁眉苦脸着。
“怎么了?”冬葵走了过去。
“啊,老师。”
“冬老师。”
“冬老师。”
“冬老师。”明明是一样的发音,怎么从朱岚汀嘴里出来就怪怪的。
冬葵忍住朱岚汀那声呼唤所带来的手脚酥麻,绷着表情:“实验不顺利?”
“嗯……”助教是个性格有些腼腆的男生,听到冬葵的询问,尴尬地挠起了后脑勺,“我们让电泳跑了十分钟,用紫外线看了一下,一个条带都没见着。PCR应该没出问题,我们每加一个试剂就打了一个勾,不可能漏,就算试剂坏了、引物错了,紫外线下也应该看到引物对应的条带才对,不可能什么都没有。”
PCR全称聚合酶链式反应,用冬葵在课上的比喻来讲,就相当于一个复印机,按照比例加入墨水、纸张和原件——引物、酶、目标DN□□段以及其他化学试剂后,就能够将“原件”DNA成倍地“复印”。
成倍的“复印”提高了溶液里的DNA浓度,在这种相对高浓度的溶液中,添点带颜色的料,加样至琼脂糖胶内,放进凝胶电泳专用的设备,通上电,DNA就能够根据不同片段的分子量大小,在胶内分出或高或低的条带。分子量越大跑的越慢,所以越靠近位置偏上或偏高的起点,分子量越小的则正好相反。
跟验钞似的,这些条带肉眼看不见,却可以通过紫外线看到。条带越亮,说明该分子量的DNA越多。如果缺少了PCR的“复印”,以“原件”的DNA量,紫外线下肉眼、哪怕是摄像头都是根本看不见的。
至于助教口中的“引物”,本质其实也是DNA,放到同样的比喻里,相当于复印机里的白纸。相比复印完成印上了字的“纸张”,引物的分子量很小很小,浓度却足够的高。所以不管PCR的“复印”成功了没有,紫外线下,都应该能够看见一条离起点最远的条带。
而什么都看不见……
冬葵从旁边的盒子里抽出双紫色手套带上,对着助教伸了伸手,“麻烦帮忙关一下灯。”
拿着UV灯一罩,果不其然,整个琼脂糖胶光溜溜的,什么都没。
冬葵又检查了一下电极,没有插反,所以不是因为DNA向着和“终点”完全相反的方向跑,跑出“赛道”了。那剩下的可能……
“GelRed放了吗?”
助教:“啊……”
“GelRed是什么?”朱岚汀仗着自己和冬葵熟,代表着不听课三人组问出了这个致命问题。
旁边两人附和着,把脑袋点的跟捣蒜似的。助教则向朱岚汀投去了敬佩的目光。
冬葵一言难尽地看了朱岚汀一眼,然后,老老实实温温和和的答道:“DNA本身不会发光,只有和染料粘在了一起,我们才能够通过荧光观测到DNA条带。GelRed是一种市面上最常用的凝胶核酸染料,使用方法是在制作果冻——琼脂糖胶的时候,加到尚未凝固的胶里面。”
“啊,这么一说,我做果冻的时候,好像没有加过你说的这种东西。”一位冬葵没去记名字的男明星哈哈笑着。
“怎么了?”冬葵走了过去。
“啊,老师。”
“冬老师。”
“冬老师。”
“冬老师。”明明是一样的发音,怎么从朱岚汀嘴里出来就怪怪的。
冬葵忍住朱岚汀那声呼唤所带来的手脚酥麻,绷着表情:“实验不顺利?”
“嗯……”助教是个性格有些腼腆的男生,听到冬葵的询问,尴尬地挠起了后脑勺,“我们让电泳跑了十分钟,用紫外线看了一下,一个条带都没见着。PCR应该没出问题,我们每加一个试剂就打了一个勾,不可能漏,就算试剂坏了、引物错了,紫外线下也应该看到引物对应的条带才对,不可能什么都没有。”
PCR全称聚合酶链式反应,用冬葵在课上的比喻来讲,就相当于一个复印机,按照比例加入墨水、纸张和原件——引物、酶、目标DN□□段以及其他化学试剂后,就能够将“原件”DNA成倍地“复印”。
成倍的“复印”提高了溶液里的DNA浓度,在这种相对高浓度的溶液中,添点带颜色的料,加样至琼脂糖胶内,放进凝胶电泳专用的设备,通上电,DNA就能够根据不同片段的分子量大小,在胶内分出或高或低的条带。分子量越大跑的越慢,所以越靠近位置偏上或偏高的起点,分子量越小的则正好相反。
跟验钞似的,这些条带肉眼看不见,却可以通过紫外线看到。条带越亮,说明该分子量的DNA越多。如果缺少了PCR的“复印”,以“原件”的DNA量,紫外线下肉眼、哪怕是摄像头都是根本看不见的。
至于助教口中的“引物”,本质其实也是DNA,放到同样的比喻里,相当于复印机里的白纸。相比复印完成印上了字的“纸张”,引物的分子量很小很小,浓度却足够的高。所以不管PCR的“复印”成功了没有,紫外线下,都应该能够看见一条离起点最远的条带。
而什么都看不见……
冬葵从旁边的盒子里抽出双紫色手套带上,对着助教伸了伸手,“麻烦帮忙关一下灯。”
拿着UV灯一罩,果不其然,整个琼脂糖胶光溜溜的,什么都没。
冬葵又检查了一下电极,没有插反,所以不是因为DNA向着和“终点”完全相反的方向跑,跑出“赛道”了。那剩下的可能……
“GelRed放了吗?”
助教:“啊……”
“GelRed是什么?”朱岚汀仗着自己和冬葵熟,代表着不听课三人组问出了这个致命问题。
旁边两人附和着,把脑袋点的跟捣蒜似的。助教则向朱岚汀投去了敬佩的目光。
冬葵一言难尽地看了朱岚汀一眼,然后,老老实实温温和和的答道:“DNA本身不会发光,只有和染料粘在了一起,我们才能够通过荧光观测到DNA条带。GelRed是一种市面上最常用的凝胶核酸染料,使用方法是在制作果冻——琼脂糖胶的时候,加到尚未凝固的胶里面。”
“啊,这么一说,我做果冻的时候,好像没有加过你说的这种东西。”一位冬葵没去记名字的男明星哈哈笑着。